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逆转录病毒系列

5 January 2009 文章作者:admin 有2,752人对该文章感兴趣

逆转录(也成为反转录病毒,Retrovirus)病毒载体是常用的病毒载体之一。反转录病毒载体在构建时,删去了pol、env基因和gag基因的3′端,但保留了病毒颗粒所需的ψ+序列。其目的是在于提高载体的安全性,防止反转录病毒进入宿主细胞后进行增殖并包装成病毒颗粒对宿主细胞造成可能的伤害。这样,在制备反转录病毒载体时,就必须有一个辅助细胞系,这种细胞内有缺陷型病毒可以提供包装用的外壳蛋白,但自身没有包装信号。这样,反转录病毒载体就可利用这些外壳蛋白包装成病毒颗粒在辅助细胞系内大量扩增。反转录病毒载体可以容纳外源DNA的长度在10 kb左右,以很高的转染率感染宿主细胞,特别是分裂中的细胞。转入宿主的细胞后,反转录病毒载体随机整合到宿主细胞基因组内,这种载体还在不断改进之中。

美国著名细胞产品公司Cell BioLabs为逆转录病毒研究人员提供完备的重组逆转录病毒表达系统及其相关产品和服务,产品包括逆转录病毒的最新一代表达系统,针对逆转录病毒滴度低的软肋而专门设计的逆转录病毒浓缩纯化试剂盒,逆转录病毒的快速定量,以及逆转录病毒高效转染试剂和用于包装重组逆转录病毒的包装细胞系等,几乎覆盖反转录病毒研究中的所有技术环节:

逆转录病毒包装细胞系(Platinum Retroviral Packaging Cell Line)

Cell Biolabs提供三种铂金版逆转录病毒包装细胞系:单嗜性(Ecotropic)Plat-E包装细胞系、双嗜性(Amphotropic)Plat-A包装细胞系及泛嗜性(Pantropic)Plat-GP包装细胞系。它们对不同的细胞具有不同的侵染性。一般来说,Plat-E是最常用的逆转录病毒包装细胞;Plat-GP则是适用性最广的逆转录包装细胞(但是需要多增加一个表达载体pVSV-G Packaging Vector提供外壳蛋白VSV-G,该外壳蛋白宿主范围非常广);Plat-A用的比较少,但是其宿主范围比Plat-E要多一些,比如可应用于人、猴、狗来源的细胞等…点击阅读更详细产品信息“逆转录病毒包装细胞系—铂金版Plat-E/Plat-A/Plat-GP系列”。

Product Name

Size

Catalog Number

Platinum-E Retroviral Packaging Cell Line, Ecotropic

>3 x 106 cells

RV-101

Platinum-A Retroviral Packaging Cell Line, Amphotropic

>3 x 106 cells

RV-102

Platinum-GP Retroviral Packaging Cell Line, Pantropic

>3 x 106 cells

RV-103

pVSV-G Packaging Vector

10 μg

RV-110

铂金版逆转录病毒表达系统(Platinum Retroviral Expression Systems)

结合具有专利技术的Plat-E及其它逆转录包装细胞系,并采用新颖的pMXs-Puro系列表达载体,共同构建高效的铂金版逆转录病毒表达系统。Cell Biolabs的铂金版逆转录病毒表达系统能有效的提高病毒的滴度(平均达到107感染滴度/ml),只需单质粒转导即可完成基因表达工作。根据包装细胞系又分为单嗜性、双嗜性和多嗜性系统,每种细胞系均能表达gag和pol基因,其中单嗜性Plat-E包装细胞系和双嗜性Plat-A包装细胞系还能表达包膜蛋白。用户只需要将感兴趣的基因克隆进穿梭载体pMXs-Puro中,转导进包装细胞内即可。如果选择多嗜性Plat-G系统,还需要VSV-G质粒提供辅助包装。

Product Name

Size

Catalog Number

Platinum-E Retroviral Expression System, Ecotropic

1 kit

VPK-300

Platinum-A Retroviral Expression System, Amphotropic

1 kit

VPK-301

Platinum-GP Retroviral Expression System, Pantropic

1 kit

VPK-302

Catalog Number Packaging Cell Line Shuttle Vector Envelope Vector Control Vector

VPK-300

Plat-E (Ecotropic) pMXs-Puro ———— pMX-GFP

VPK-301

Plat-A (Amphotropic) pMXs-Puro ———— pMX-GFP

VPK-302

Plat-GP (Pantropic) pMXs-Puro pCMV-VSV-G pMX-GFP

ViraBind™ 逆转录病毒浓缩&纯化试剂盒(ViraBind™ Retrovirus Concentration & Purification Kits)

Cell Biolabs研制出的拥有专利技术的ViraBind™ 逆转录病毒纯化试剂,再结合新型的纯化装置,能在4-6小时内,每次能将100ml病毒上清纯化500-1000倍,从而获得109-1010TU/ml感染滴度的逆转录病毒颗粒。采用该Kit纯化获得的逆转录病毒液,不含有游离的包装蛋白以及转导抑制物,非常有利于后继的逆转录病毒操作。Cell Biolabs提供两种逆转录病毒纯化方案,一种是用纯化柱装置,另一种是PLUS的采用透析柱装置。前者纯化过程快速,只需3小时;后者采用了透析柱装置,时间上要过夜透析,但是纯度更高…点击阅读更详细产品信息“ViraBind™ 逆转录病毒浓缩&纯化试剂盒”。

Product Name

Size

Catalog Number

ViraBind™ Retrovirus Concentration and Purification Kit (100 ml/prep)

2 Preps

VPK-130

5 Preps

VPK-131

25 Preps

VPK-131-5

Product Name

Size

Catalog Number

ViraBind™ PLUS Retrovirus Concentration and Purification Kit (50 ml/prep)

2 Preps

VPK-135

ViraBind™ PLUS Retrovirus Concentration and Purification Mega Kit (500 ml/prep)

2 Preps

VPK-136

10 Preps

VPK-136-5

QuickTiter™ 逆转录病毒快速定量试剂盒(QuickTiter™ Retrovirus Rapid Quantitation Kit)

QuickTiter™逆转录病毒快速定量试剂盒采用了专利的捕获胶技术,能专门结合逆转录病毒颗粒,从而大大缩减试验时间,并提高定量的准确度。其定量试剂盒都能对已经纯化的和未纯化的病毒液进行检测。Cell Biolabs独有的QuickTiter™ 逆转录病毒快速定量试剂盒通过检测逆转录病毒DNA含量来测定其滴度,可以快速定量已纯化或未纯化的逆转录病毒,通过480/520 nm滤镜荧光仪下读取数据,对照腺标准曲线得出滴度。可以在45-60min内获得数据,检测灵敏,能有效检测1.5 X 109 Viral Particles (VP)/mL浓度内的逆转录病毒,可做20次…点击阅读更详细产品信息“QuickTiter™ 逆转录病毒快速定量试剂盒”。

Product Name

Detection

Size

Catalog Number

QuickTiter™ Retrovirus Quantitation Kit

Fluorometric

20 Assay

VPK-120

ViraDuctin™ 逆转录病毒高效转染试剂(ViraDuctin™ Retrovirus Transduction Kit)

Cell BioLabs针对逆转录相关病毒转导过程中的主要问题,开发出ViraDuctin™ 逆转录病毒高效转导试剂(ViraDuctin™ Retrovirus Transduction Kit)。该试剂盒能高效提高逆转录病毒在多种细胞内的转导效率,包括传统转导方法转导较低的细胞非分裂细胞。该转导试剂使用便捷,只需2小时。与Polybrene(聚凝胺)相比,转导效率提高2-6倍,对于难转导的细胞,如原代细胞和干细胞也有非常好的效果…点击阅读更详细产品信息“ViraDuctin™ 逆转录病毒高效转染试剂”。

Product Name

Size

Catalog Number

ViraDuctin™ Retrovirus Transduction Kit

40 Transductions

RV-200

200 Transductions

RV-201

重组逆转录病毒克隆载体(Recombinant Retroviral Cloning Vectors)

逆转录表达载体种类较多,根据其基本载体骨架分为pBABE、pMCs、pMXs、pMYx等,又有不同筛选标记,hygro(潮霉素)、neo(新霉素)、puro(嘌呤霉素)、Blasticidin(杀稻瘟素)等。很多逆转录病毒载体包括pBABE和pMXs都是基于莫洛尼鼠白血病病毒 (MMLV),这种逆转录病毒载体在一些非成熟细胞里面被沉默表达,如胚胎瘤细胞、胚胎干细胞和造血干细胞,因此适应面受到限制。而骨髓瘤病毒(MPSV)和PCC4细胞来源的骨髓瘤病毒(PCMV)是MMLV的变种,能很好的在上述非成熟细胞内稳定表达。Cell Biolabs的pMCs 、pMYs和pMZs都在MMLV启动子的基础上又加上了PCMV或MPSV启动子,后者能使逆转录病毒在EC肿瘤干细胞和ES胚胎干细胞内更稳定表达。特别的,pMYs系统更适合于造血干细胞中的外源基因表达,pMC则更适合在EC和ES细胞内使用…点击阅读更详细产品信息“重组逆转录病毒克隆载体”。

预装基因的重组逆转录病毒克隆载体(Gene-Specific Recombinant Retroviral Vectors)

Cell Biolabs还为您提供插入了外源基因的重组逆转录病毒表达载体,基因涉及GFP等报告基因、转录调控基因、蛋白酶基因、细胞周期相关基因、细胞骨架调控基因、MAP激酶信号基因等。

美国著名细胞学试剂专家Cell BioLabs为您提供全套的逆转录病毒技术解决方案,三种铂金版逆转录病毒包装细胞系供您选择,另外还有多种逆转录病毒克隆载体以及完整的表达系统,还有预装有多种重组基因的逆转录病毒载体供您直接使用,ViraBind™逆转录病毒浓缩&纯化试剂盒采用了专利技术能让你获得更高滴度和纯度的逆转录病毒,其QuickTiter™逆转录病毒快速定量试剂盒采用了专利的捕获胶技术,能专门结合逆转录病毒颗粒,从而大大缩减试验时间,并提高定量的准确度。Cell BioLabs还有转为腺病毒转导用的高效转导试剂供您选择,如果您对上述逆转录病毒产品感兴趣,请请致电010-88597838/9569/8795/4237到西美杰科技有限公司垂询逆转录病毒相关的实验解决方案,或索取最新的Cell BioLabs产品资料。

武汉艾美捷塑料包装有限公司
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